【www.cy316.com - 乌龙茶萎凋】
摘 要：白茶酶活性高。对干茶进行了感官审评，初步得出以下结论，在本地区，选用槠叶种采用重做青方式制作乌龙茶有利于乌龙茶特征性香气品质的形成。
关键词：Study on Variation of β-Glucosidase Activity during Withering and Shaking of Oolong Tea
ZHANG Xiu-yun,FANG Shi-hui,XIA Tao
(Key Laboratory of Tea Biotechnology,Ministry of Agriculture,Anhui Agricultural University,Hefei 230036)
Abstract:
Key words:
乌龙茶加工过程中鲜叶经萎凋做青等特有的加工工序，含水量逐渐减少，内含物质也相应发 生复杂的理化变化，特别是香气成分的变化更为明显。从感官上观察，鲜叶显露明显的青草 气，随着加工过程的进行，由于茶树品种不同，因而呈现不同的香型，如清香、兰花香、桂 花香等。从分子水平上分析，乌龙茶的特征性香气成分有：芳樟醇及其氧化物、苯甲醇、2 -苯乙醇、橙花叔醇、顺-茉莉酮、茉莉酮内酯、茉莉酮酸甲酯和吲哚［1］。这些 物质特别是醇系香气物质大多以结合态糖苷形式存在茶鲜叶中，在加工过程中，与内源酶充 分接触，水解生成游离态的挥发性化合物［2，3］，很多种这些化合物协调作用， 被嗅觉器官所感知，则表现为各种不同特征的香型。β-葡萄糖苷酶是一种对茶叶香气的形 成具有重要作用的水解酶类，对它的性质、作用机理等方面进行深入研究具有一定的理论意 义和实践意义。
本试验拟就乌龙茶萎凋做青过程中β-葡萄糖苷酶活性的变化进一步研究，为进一步弄清乌 龙茶香气形成机理提供理论依据，同时也为更好地指导生产，促进茶叶品质的提高。
1 材料与方法
1.1 材料
鲜叶原料采自安徽农业大学教学实验茶园的福鼎大白茶和槠叶群体种，采摘标准为开面2～4 叶。
1.2 实验方法
品种试验：福鼎大白茶和槠叶种均以重做青方式进行。具体做法如下：鲜叶经日光萎凋(气 温28～30℃，相对湿度65%左右，摊叶厚度0.4 kg/m2)，约30 min后，室内静置约15 min ，移入做青间内(温度20～25℃，相对湿度70%～80%，采用空调维持做青间温湿度)。每隔一 段时间摇青1次，每次间隔时间先短后长再短，具体分配如下：1 h、1.5 h、1.5 h、2 h 、2 h、1.5 h、1.5 h(、1 h)，摇青在滚筒式摇青机中进行，转速28～30 r/min，共摇7 ～8次，具体摇青时间分配为(min)：3、4、5、5、4、4、3(、2)，历时12 h左右。操作时尽 量使两品种保持一致，以保证实验结果的可比性。
做青程度试验：槠叶种采用轻重两种不同做青方式。其余条件保持一致，以保证加工工艺对 酶活性影响的唯一性。轻做青是仿照台式清香型乌龙茶的制法，以拌青代替摇青，用双手将 叶轻轻捧起，抖动，让其自然下落。随着摇青次数的增加，手势呈“轻—重—轻”变化，每 次拌青时间同上，也呈“少—多—少”的趋势。
鲜叶、萎凋叶及做青中每两次摇青取样1次，所取样品置冰箱中冷冻保存，供测β-葡萄糖 苷酶活性用。
1.3 β-葡萄糖苷酶活性测定
2 结果与分析
2.1 不同品种之间酶活性比较
对槠叶种和福鼎大白茶两品种采用同一种加工工艺(重做青)，研究结果显示，β-葡萄糖苷 酶的活性随加工过程的进行呈基本相同的变化趋势，但槠叶种中酶活性明显高于福鼎大白茶 ，且变化幅度较大，在做青过程中，它的最大活性达鲜叶的2.33倍，而福鼎大白茶仅为鲜 叶的2.21倍；在整个萎凋做青过程中，福鼎大白茶的酶活性只有槠叶种的59.3%～81.3% 不等(表1)。说明酶活性的动态变化主要受加工方式和环境温湿度的影响，而活性的高低则 与品种有很大关系［5］。
表1 不同品种间酶活性的比较
Table 1 β-glucosidase activity of different cultivars
品 种鲜叶萎凋叶二摇四摇六摇八摇槠叶种0.3810.6760.5990.6320.8880.612福鼎大白茶0.2260.5500.4860.4120.5000.462
2.2 不同做青程度对酶活性的影响乌龙茶在做青过程中，通过摇青或拌青使叶缘细胞破损，细胞液中的糖苷与糖苷水解酶充分 接触，因而加快了键合态香气的释放速度［6］。做青工艺不同，叶片失水速度不一 致，细胞破损程度也有差异，导致酶活性高低有别。重做青过程中，细胞破损程度较大，酶 活性的变化幅度也大，达0.204个OD单位，而轻做青过程中，酶活性变化基本呈平稳上升， 变化幅度只有0.161个OD单位(表2)。
表2 不同做青程度对酶活性的影响
Table 2 Effect of shaking degree on β-glucosidase activity
做青工艺鲜叶萎凋叶二摇/拌四摇/拌六摇/拌八摇/拌重做青0.4590.6190.3990.5860.6950.510轻做青0.4590.5060.5070.4980.6200.538
通过研究与分析还发现，在整个萎凋、做青过程中，酶活性均呈双峰变化趋势，两次高 峰分别出现在萎凋结束和做青结束前约2 h(表1、表2)。有研究表明［7，8，9］ ，氧化还原酶的强活性能抑制水解酶的活性。做青临近结束时，由于茶鲜叶失水较多，细胞 膜透性增大，多酚类物质的酶促氧化作用增强，对β-葡萄糖苷酶活性有一定的抑制作用， 因此做青结束时β-葡萄糖苷酶活性不是继续升高，而是呈下降的趋势。但是，其内在机理 还有待于进一步研究。另外，对上述做青工艺所制茶样进行感官审评，结果表明，槠叶种以重做青方式加工所得茶 样，花香高爽持久，其鲜爽度和持久度都较其余两只茶样好；滋味的醇度、厚度和爽度也相 应较高；轻做青方式加工所得茶样，可能由于发酵不足，稍微有些青气，滋味也微带青涩； 福鼎大白茶品种所制茶样，由于
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通常采用萎凋槽萎凋。萎凋时掌握好温度、风量、摊叶厚度、翻抖、萎凋时间等外部条件。
（一）温度一般鼓风气流温度控制在35℃左右，最高不超过38℃。槽体前后温度要比较一致，才能获得较好的萎凋质量和提高生产效率。从萎凋质量看，温度偏低比温度偏高的质量好。气流温度超过38℃甚至40℃以上，虽然可以缩短萎凋时间、提高效率，但鲜叶失水过快，理化变化激烈，萎凋不匀，芽叶尖端和叶缘枯干，甚至发生红变，尤其是大叶种的鲜叶，此种弊病更为显着。因此，尽管在采摘高峰期，鲜叶量多，只能增加设备，不能采取高温快速萎凋。掌握温度高低，要根据具体情况灵活控制。一般在夏、秋季节自然气温较高，空气相对湿度较小，就不必加温，只鼓风，既节省燃料，又提高品质；雨水叶和露水叶，要先鼓冷风，吹干表面水后再加温，以免闷热损害鲜叶。萎凋过程中，温度掌握要“先高后低”。萎凋前期温度可稍高，随着萎凋的进展温度要逐步降低，下叶前10～15分钟停止加温，只鼓冷风，降低叶温。为使萎凋失水均匀，在萎凋过程中可每隔l小时停止鼓风10分钟，效果较好。
（二）风量一般萎凋槽长10米、宽1.5米，盛叶框边高20厘米，有效摊叶面积15平方米。此种规格的萎凋槽采用7号轴流风机，功率2.8千瓦，转速每分钟1440转，风量每小时16000～20000立方米，风压3.3～4千帕（25～30毫米汞柱），这种风量基本能满足萎凋要求。风既是热量传导的介质，又能及时吹散叶表水蒸气。风量不足，影响水分散失的速度；风量过大，叶层出现“空洞”，特别是大叶种的鲜叶更易红变，萎凋不匀。风量大小应根据叶层厚薄和叶质柔软程度而定，即根据叶层通气性能的大小加以适当调节。20世纪80年代后，国外大型萎凋槽技术在一些大型茶厂使用，萎凋槽不仅尺寸大，有1.8～2米宽、18～20米长，而且风机的风量大，达到每小时36000立方米。
（三）摊叶厚度每条15平方米的小型萎凋槽，摊叶量240千克左右；36平方米的大型萎凋槽可以摊放1500千克左右的鲜叶，是小槽的5～7倍。嫩叶薄摊，老叶厚摊。小叶种一般摊放厚度20厘米左右，大叶种18厘米左右。摊放时要把叶子抖散摊平，使叶子呈蓬松状态，保持厚薄一致、松紧度一致，以利于通风均匀。
（四）翻抖萎凋槽摊叶较厚，各层叶子失水程度不一，为使萎凋均匀和加速萎凋，在萎凋中应适当翻抖。一般在每小时停风时翻抖1次。要注意翻透，上层抖翻到下层，摊平抖松，增加叶层间通气性。动作要轻，以免损伤芽叶。雨水叶、露水叶在萎凋前段时间可每30分钟翻抖1次。如果萎凋槽前后萎凋不一致，可把槽内的茶叶前后调换一下。
（五）萎凋时间一般都以达到萎凋适度为终止时间。用萎凋槽萎凋，根据各地试验结果，以8～12小时达到萎凋适度品质较好。
萎凋适度的经验判断：根据萎凋叶的物理特征来判断。即叶形萎缩，叶质柔软，茎脉失水而萎软，曲折不易脆断；手捏叶片有柔软感、无摩擦响声；紧握叶子成团，松手时叶子能够松散；叶色转为暗绿，表面光泽消失；鲜叶的青草气减退，透出萎凋叶特有的清香。
不同季节萎凋程度掌握不同。一般地区春季雨多湿重，鲜叶含水量高，春茶萎凋叶含水量掌握偏低，为60%～62%；夏季温高湿低，鲜叶含水量低，夏茶萎凋叶含水量应偏高，为62%～64%。
云南工夫红茶主产区凤庆、临沧等地，各季气候情况与一般地区不同。春茶期，尤其是春茶前、中期，属于干季，温高湿低，鲜叶含水量低，室内自然萎凋白天只需5～6小时。为防止萎凋过度，春茶萎凋程度“宁轻勿重”，含水量62%～ 64%。夏茶正处雨季，雨多湿重，鲜叶含水量高，萎凋程度掌握“宁老勿轻”，含水量60%～62%。祁红适度的萎凋含水量为58%～64%，春茶偏低，58%～61%；夏、秋茶略高，61%～64%。
四川茶园土壤中脲酶活性研究
摘 要 用苯酚一次氯酸钠比色法，分析了四川几种主要茶园土壤脲酶活性状况。结果表明，在同一时期，不同种类茶园土壤中脲酶活性差异较大；随着季节的不同，土壤中脲酶活性也有较大变化；同时，在不同的土层中，其脲酶活性也表现出不一样。另经相关分析，土壤中脲酶活性与全氮、有机质、速效氮等关系密切。
关键词 茶园土壤 脲酶 脲酶活性
土壤中的一切生物化学反应，实际上都是在酶的参与下进行的，土壤的酶活性反映了土壤中进行的各种生物化学过程的强度和方向。脲酶是土壤中的主要酶类之一，МиНЕНКО等研究证明，土壤脲酶对土壤中氮的转化，特别是对尿素的利用率等有重要影响作用，而尿素是一种优质氮肥，在当今世界农业中广泛应用，因此，国外如苏联、英国、匈牙利等国科研人员对参与尿素水解的脲酶研究极为重视，对脲酶的活性以及利用其活性提高尿素的利用率等进行了较多研究；我国关松荫等对一些耕作土壤和森林土壤脲酶有一定研究，而茶园土壤作为一种较为特殊的耕作土壤，对其脲酶活性研究，国内尚属空白。因此，作者为了探明四川茶区各种土壤中的脲酶活性状况、分布规律及其与土壤肥力关系等，特展开研究，旨在为今后深入研究并利用茶园土壤脲酶活性潜能提供依据。
1 材料与方法
1.1 供试土壤
供试土壤为四川茶区茶园土壤，主要为砂岩黄壤、灰岩黄壤、老冲积黄壤和酸性紫色土，分别采自永川市(四川省农科院茶研所试验茶场)、涪陵市枳城区(个体茶园)、成都郫县(四川省茶研所郫县试验场)和乐山市(个体茶园)。各土壤基本性状见表1。
表1 供试土壤基本性状
土壤类型pH有机质
(%)全氮
(%)速效氮
(mg/kg)速效磷
(P)
(mg/kg)速效钾
(K)
(mg/kg)砂岩黄壤5.41.390.8229.3638.92
56.74
灰岩黄壤5.71.210.7624.2438.0450.28老冲积黄壤5.61.060.6420.3730.2842.39酸性紫色土5.81.170.7327.3439.26109.56 1.2 试验方法根据研究内容，在各茶区选取有代表性的壮年茶园，随机设点挖取剖面，分层取样，每种土样按试验设计(见结果与讨论各部分)取土，土样风干后，分析其脲酶活性及其它指标。
1.3 分析测定方法
土壤脲酶活性用茶酚一次氯酸钠比色法。取5g风干土样于50ml三角瓶中，加1ml甲苯，15min后加10ml 10%尿素和20ml pH6.6柠檬酸盐缓冲液，摇匀后在37℃恒温箱中培养24h，过滤后取3ml滤液注入50ml容量瓶中，再加蒸馏水17ml、苯酚钠液4ml和次氯酸钠液3ml，随加随摇，20min后显色、定容，1h内在分光光度计上于波长578nm处比色测定。同时做标准曲线和空白试验、无基质对照试验。土壤有机质、全氮、速效氮、速效磷、速效钾和pH值均按常规方法测定。
2 结果与讨论
2.1 四川茶园土壤脲酶活性状况
Skujins、Delaune等人研究证明，土壤酶活性的强弱，受土壤物理性状、气温等多种因素影响，因此，该试验于1995～1997年每年气温较高的7月中旬进行取样测定，研究茶园土壤脲酶在较高的气温(土温)下的活性状况；另外由于茶树根系大部分集中在0～40cm土层内，因此，每种土样均取自0～40cm土层，充分混和，风干测定。表2结果表明，砂岩黄壤茶园中脲酶活性最高，在NH3－N 0.82～1.17mg/g.37℃.24h(以下各酶活性数据单位表示方法均同)之间，平均为0.96；其次为灰岩黄壤，其活性在0.85～0.98之间，均值为0.90；而老冲积黄壤的脲酶活性最低，均值为0.51；酸性紫色土的脲酶活性居中。分析以上脲酶活性状况，笔者认为是由以下因素综合作用所致：第一是由于土壤中有机质含量的影响，据笔者研究，茶园土壤中脲酶活性与土壤有机质含量呈正相关(见表4)，从表1可以看出，砂岩黄壤有机质量最高，灰岩黄壤其次，而老冲积黄壤最低；第二是由于土壤物理状况的影响。由于老冲积黄壤板结、质地粘重，致使土壤透气性差，直接影响到酶活性的强弱；第三是由气温状况所致。从表2中可看出，砂岩黄壤和灰岩黄壤(试验点)均地处川东地区，而老冲积黄壤和酸性紫色土则位于川西或川西南，两地同一时期气温差异较大，因此气温的大小直接影响到土温差异，所以在土温相对较高的土壤中，其脲酶活性则强些(表3数据可进一步证明)。
表2 四川茶园土壤脲酶活性状况
土壤类型地区脲酶活性均值砂岩黄壤永川市(川东)0.82～1.170.96灰岩黄壤涪陵市(川东)0.85～0.980.90老冲积黄壤成都郫县(川西)0.48～0.650.51酸性紫色土乐山市(川东南)0.55～0.680.62
注：脲酶活性表示单位：NH3－N mg/g.37℃.24h，以下各表均同。样本数均为12个。
表3 土壤脲酶活性的季节性变化及剖面分布规律
<茶叶发酵萎凋过程中过程介绍
在制茶界萎凋又被称为“走水”，这个词听起来很名符其实。在整个萎凋过程中，在茶青保持着生机的前提下，叶子的水分按部就班地顺着叶脉慢慢地消散着，通过叶缘的水孔与叶面的气孔(大部分是在叶底)蒸发，使茶青中的酶进行着有机氧化，从而形成了色、香、味俱佳的上等茶。如果不慎将茶青晒干或是阴干的话，就成为“死叶”，那就造不出人们喜爱的茶饮品了。
发酵在一般茶上(除后发酵茶)，是一种单纯的氧化作用，只要将茶青放在空气中即可。就茶青的每个细胞而言，要先萎凋才能引起发酵，但就整片叶子而言，是随萎凋而逐渐进行的，只是在萎凋的后段，搅拌与堆厚后会快速进行。
(1)颜色的变化：
没有经过发酵的茶叶是绿色的，发酵之后会逐渐变红，发酵的程度与茶叶的颜色深浅成正比，叶子自身与沏出的茶水颜色都是相同的。因此我们只需看一下沏出茶水的颜色是偏绿还是偏红，便知该茶发酵的程度。
龙井、碧螺春等，无论是叶子自身还是沏出的茶水都呈现出较绿的颜色，原因是不发酵；而红茶呈现出浓浓的红色，原因是全发酵；这两类茶之间还存在着一种茶，就是常说的乌龙茶，如武夷岩茶、凤凰单丛，颜色金黄，那是部分发酵。
(2)香气的变化：
没有经过发酵的茶，是属菜香型，使之轻微发酵，大概20％左右，就属于花香型，使之深一步地发酵，大概30％左右，就属于坚果香型，再使之进一步地发酵，大概60％左右，就成为熟果香型，如果完全发酵，那就形成了糖香型(这里所指的发酵百分比是指叶子的变红程度)。
(3)味道的变化：
愈少发酵的茶愈贴近天然植物的味道，愈多的发酵，与天然植物的味道相差越遥远。
发酵对茶青产生的变化一目了然，接下来的就要取决于制造者的意向了。如果生产出最贴近天然植物的味道，那就勿将茶青进行发酵，这样生产出来的茶就是绿色的茶、清香型的茶，即市场上所说的绿茶。要是不喜欢它那么绿，而希望有小小的变化，那就将它略微发酵，大概20％，就会生产出绿中带黄的茶水、属于花香型并贴近天然植物味道的茶，即市场上所称的包种茶、冻顶茶之类。假如再想要发酵深一步呢？大概30％左右，就会生产出蜜黄色的茶汤、属于坚果香的茶、距植物天然味道稍远的茶，即市场上所称的铁观音、水仙、佛手之类(近来这类茶有偏轻发酵的流行趋势)。再进一步地发酵，大概60％5那就生产出了橘红色的茶，属于熟果香、距植物天然风味较远的茶，即市场上所称的白毫乌龙。假如想要完全发酵，生产出来的就是红色茶，属糖香型、最具备人工味道的红茶了。